TaqMan-MGB 探针实时荧光定量PCR 快速检测光滑念珠菌

目的：采用 TaqMan-MGB 探针作为检测信号，建立快速检测光滑念珠菌的实时荧光定量 PCR 方法。方法以光滑念珠菌核糖体 RNA 编码基因（rDNA）中的内转录间隔区2（ITS2）作为靶基因，设计特异性引物和 TaqMan-MGB 探针。在梯度光滑念珠菌纯菌液标本中评价所建方法灵敏度和重复性；在102株光滑念珠菌临床分离株、非光滑念珠菌的其他4种念珠菌临床分离株、7种细菌临床分离株和人基因组的 DNA 中评价所建方法特异度；并在模拟光滑念珠菌血症的血标本中初步探讨其临床应用价值。结果所建方法对光滑念珠菌纯菌液的检测下限为101 CFU／ml，相应的批内、批间变异系数（CV）分别为1．68％和2．84％。对102株光滑念珠菌临床分离株检出率为100％；对非光滑念珠菌无交叉反应，显示该方法特异性为100％。对模拟光滑念珠菌血症血标本的最低检测下限为101 CFU／ml。结论所建方法具有特异性和灵敏度高、重复性好的特性，适于临床上光滑念珠菌血症的快速检测。