M型磷脂酶A2受体抗体高灵敏定量方法的建立及临床应用

目的 建立抗PLA2R抗体的超灵敏定量检测方法,改进抗PLA2R抗体检测在膜性肾病诊治中的应用.方法 筛选出一个含高浓度抗PLA2R抗体的血清,采用尿素解离结合在PLA2R包被孔上的抗PLA2R抗体,并进行IgG抗体定量,推算出原血清中抗PLA2R抗体的浓度,将此已知抗PLA2R抗体浓度的样品稀释到不同浓度作为抗PLA2R抗体的标准品.建立抗PLA2R抗体TRFIA检测方法,从批内批间精密度、灵敏度、回收率、测量范围、临床应用等方面对建立的TRFIA方法进行评价.结果 制备了抗PLA2R抗体标准品,设置的抗PLA2R抗体的标准品浓度分别为0 μg/ml、0.17μg/ml、0.68 μg/ml、3.42 μg/ml、17.1μg/ml、68.4 μg/ml、343μg/ml.有效检测范围为0.02μg/mL-343 μg/ml,3份标本的回收率均值为98.96％,低、中、高浓度批内CV％(n=20)分别为6.38％、5.55％、4.88％,低、中、高浓度批间(n=8)CV％分别为7.69％、6.23％、6％,均＜10％.正常参考范围为0-0.89 μg/ml,29％的IgA肾病、44.4％的红斑狼疮肾病、88.5％的IMN抗PLA2R抗体阳性.红斑狼疮肾病患者、IgA肾病患者和IMN患者的血清PLA2R抗体含量均显著高于健康体检者,对应的P值分别为0.036、0.034和0.000,P均＜0.05.以正常健康人作为对照组,血清抗PLA2R-IgG抗体在红斑狼疮肾病、IgA肾病和IMN的灵敏度和特异度曲线下面积AU-CROC分别为:0.738、0.607、0.968,其中对应肾病的检测准确性程度由高到低分别为:IMN、红斑狼疮、IgA肾病.结论 为膜性肾病患者提供一个除穿刺以外的可临床实际应用的血清学诊断指标,为该病的诊断、活动性的判断、治疗时机的把握、药物的选择及疗效判断提供了一个理想的血清学标志物.