Apelin-13对巨噬细胞极化的影响

目的 探讨合成型Apelin-13对人脐带源间充质干细胞(human umbilical cord derived mesenchymal stem cell,HUCMSC)与单核巨噬细胞THP-1共培养体系中巨噬细胞极化的影响.方法 单核巨噬系细胞THP-1,复苏培养后用佛波酯(phorbol ester,PMA)+脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)+重组人干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)诱导为M1型巨噬细胞,分为空白对照组和低、中、高浓度组,与HUCMSC共培养后分别用质量浓度为0、100、500、1 000 μg/L的Apelin-13进行干预.干预48 h,应用倒置显微镜观察细胞形态;收集M1型巨噬细胞及共培养体系中上层小室内的贴壁巨噬细胞,应用流式细胞术检测细胞膜蛋白CD86及CD206表达;采用ELISA法检测上清液中白细胞介素(interleukin,IL)-4、IL-6、IL-10、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、转化生长因子-β1(transforminggrowth factor-β1,TGF-β1)表达.结果 Apelin-13干预48 h,THP-1细胞形态由棒状、放射状、树枝状转变为圆形、类圆形,黏附性增强,细胞内颗粒增多,且随Apelin-13浓度增高细胞形态变化明显;低、中、高浓度组细胞表面膜蛋白CD86阳性表达率[(5.633±0.153)％、(3.040±0.529)％、(2.860±0.531)％]低于空白对照组[(16.710±0.103)％],CD206阳性表达率[(93.633±0.351)％、(94.100±0.266)％、(97.402±0.265)％]高于空白对照组[(73.220±1.307)％](P＜0.05);中、高浓度组CD86阳性表达率低于低浓度组(P＜0.05),中浓度组与高浓度组比较差异无统计学意义(P＞0.05);高浓度组CD206阳性表达率高于低、中浓度组(P＜0.05),低浓度组与中浓度组比较差异无统计学意义(P＞0.05).低、中、高浓度组IL-6(1.006±0.007、0.682±0.004、0.346±0.004)、IL-1β(1.468±0.033、0.919±0.014、0.908±0.018)、TNF-α (0.880±0.004、0.285±0.005、0.278±0.005)吸光度(optical density,OD)值低于空白对照组(1.417±0.005、1.907±0.004、1.301±0.006) (P＜0.05),IL-4 (0.101±0.004、0.155±0.003、0.248±0.005)、IL-10(0.117±0.004、0.154±0.002、0.188±0.002)、TGF-β1 (0.173±0.006、0.179±0.003、0.322±0.005)OD值高于空白对照组(0.075±0.002、0.088±0.001、0.073±0.001)(P＜0.05);中、高浓度组IL-6、IL-1β、TNF-α OD值低于低浓度组(P＜0.05),IL-4、IL-10 OD值高于低浓度组(P＜0.05);高浓度组TGF-β1 OD值高于低浓度组(P＜0.05);高浓度组IL-6OD值低于中浓度组(P＜0.05),IL-4、IL-10、TGF-β1 OD值高于中浓度组(P＜0.05),IL-1β、TNF-α OD值与中浓度组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 Apelin-13可促进HUCMSC与THP-1细胞共培养体系中巨噬细胞极化,增加IL-4、IL-10、TGF-β1等抗炎细胞因子分泌,且呈浓度依赖性.