沙门菌分离、筛检和确认流程技术关键点分析

目的 基于标准方法构建多维组合流程,分析和评价沙门菌常规检测的技术关键点.方法 构建沙门菌选择性增菌液和平板构成的检测流程,使用标准菌株检测4种选择性增菌液的回收率,验证3类5种沙门菌选择性平板的典型特征.通过实样比较不同选择性增菌液和平板组合在沙门菌检测过程中疑似菌落甄别、筛检效率和敏感性差异.结果 罗伯特增菌液(RV)、四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB)和亚硒酸盐煌绿增菌液(SBG)回收效能与亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC)相差1个稀释度,前3种增菌液适合非伤寒沙门菌的增殖,SC适合伤寒和副伤寒沙门菌的增殖.双糖管筛选法符合预期参比菌株表型.除沙门菌显色平板(CAS)外,其他选择性平板的菌株验证均可能产生菌落小和硫化氢(H2S)阴性不典型菌落;84件肉制品和水产品样品中确认阳性25件(29.76％),检出42株沙门菌.RV、TTB、SBG、SC联合CAS和木糖赖氨酸脱氧胆酸盐平板(XLD)筛检沙门菌的敏感性分别为88％、84％、72％和0;RV和TTB、RV和SBG、TTB和SBG的组合敏感性分别为100％、92％和88％.3种增菌液与任一选择性平板组合的分离敏感性为48％～68％.双糖管筛检疑似菌落的特异性和阳性预测值较高.42株沙门菌经系统生化、质谱和血清学鉴定确认.结论 经验证的双增菌液和双平板的组合能有效提高食品沙门菌检测的敏感性.梯度增菌、菌落识别和初筛效率是沙门菌检测技术的关键点.