PFC体内递增诱导建立S180肿瘤多药耐药模型及其稳定性观察

目的 小鼠体内诱导建立获得性S180多药耐药(multi-drug resistance,MDR)模型及其稳定性观察.方法 模拟临床顺铂+氟尿嘧啶+环磷酰胺(PFC)化疗方案给药,分三个阶段剂量递增法诱导S180腹水瘤小鼠,建立获得性S180MDR实验模型.采用噻唑蓝(MTT)法、流式细胞术动态检测各阶段所诱导细胞对化疗药物的耐药倍数、细胞内药物积累量及细胞膜P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)功能活性,并通过检测以上指标观察各阶段所诱导细胞停药后的耐药稳定性;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各阶段所诱导细胞MDR-1 mRNA、多药耐药相关蛋白-1 (multidrug resistance-associated protein 1,MRP-1) mRNA的表达量.结果 与亲本细胞对照组比较,各阶段所诱导S180细胞对化疗药物的耐药倍数随着诱导时间延长和剂量增高而逐渐增大,细胞内阿霉素(adriamycin,ADR)积累量逐渐减少,细胞P-gp功能活性逐渐增强;各阶段所诱导S180细胞MDR-1mRNA、MRP-1 mRNA的表达量也与诱导时间和给药剂量呈正相关;第一、二和三阶段所诱导细胞的稳定耐药时间分别为1周、2周和3周左右.结论 模拟临床PFC化疗方案给药,采用分阶段剂量递增小鼠体内诱导法可建立耐药强度高、稳定时间长的获得性S 180MDR实验模型.