间充质干细胞上清提取物对糖尿病皮肤溃疡大鼠模型溃疡组织中肿瘤坏死因子-α及 凋亡蛋白caspase-3的作用研究

目的 探讨脐带间充质干细胞(UCMSCs)上清提取物对糖尿病皮肤溃疡(DSU)大鼠模型溃疡组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及凋亡蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)的影响.方法 将45只Sprague-Dawley大鼠按随机数字表法分为急性损伤伤口组(对照组)、DSU+生理盐水干预组和DSU+UCMSCs上清提取物干预治疗组,每组15只.大鼠经尾静脉注射四氧嘧啶并给予高脂饲料喂养制作糖尿病模型,再在此基础上构建DSU模型.对照组大鼠建立糖尿病模型后只划伤口不注入金黄色葡萄球菌,皮下注射100μl生理盐水.另外两组大鼠构建DSU模型成功后,DSU+生理盐水干预组大鼠尾静脉注射100μl生理盐水,溃疡处滴加100μl生理盐水;DSU+UCMSCs上清提取物干预治疗组将UCMSCs上清冻干粉溶于200μl生理盐水中,尾静脉注射100μl,同时溃疡处滴加100μl.干预治疗5 d后,采用放射免疫法检测大鼠血清TNF-α水平,实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测大鼠溃疡处组织中TNF-α和caspase-3的表达.结果 DSU+生理盐水干预组大鼠血清TNF-α水平[(35.9±3.7)μg/L]明显高于对照组[(11.4±4.9)μg/L]和DSU+UCMSCs上清提取物干预治疗组[(14.7±6.6)μg/L],差异均具有统计学意义(均P<0.05).DSU+UCMSCs上清提取物干预治疗组大鼠溃疡组织中TNF-α和caspase-3的mRNA及蛋白表达明显低于DSU+生理盐水干预组(均P<0.05);而对照组TNF-α和caspase-3的mRNA及蛋白表达与DSU+UCMSCs上清提取物干预治疗组比较,差异均无统计学意义(均P>0.05).结论 UCMSCs上清液提取物干预治疗可有效下调DSU大鼠溃疡组织中TNF-α和caspase-3的表达,起到抗炎、抗凋亡的作用.