AD病人血清及表观遗传学药物处理后SK-N-SH细胞培养上清中蛋白二级结构的圆二色谱分析

目的 观察阿尔茨海默症(AD)病人血清及不同表观遗传学药物处理后的SK-N-SH细胞培养液中蛋白二级结构的变化情况.方法 采用圆二色谱法(CD)对AD病人及正常老人血清中蛋白二级结构进行检测分析;对Aβ25-35处理前、后人神经瘤母细胞(SK-N-SH)上清中的蛋白二级结构进行对比分析;分别对DNA甲基化转移酶抑制剂脱氧氮杂胞苷(DAC)及去乙酰化抑制药物曲古抑菌素A(TSA)处理后SK-N-SH细胞上清中的蛋白二级结构进行分析比较.结果 ①AD病人和正常对照样本血清样本中,二者大分子结构具有明显变化.与正常对照组相比,AD病人的血清中Helix和Random的结构成分明显降低,而Beta和Turn的结构成分则显著升高(P＜0.05,或P＜0.01);②经过Aβ25-35处理2d后,SK-N-SH细胞培养液中Helix和Turn结构的含量显著降低(P＜0.05),而Beta结构则明显增高(P＜0.05);③不同的表观遗传学药物及不同的处理时间对细胞培养环境中大分子结构的影响不同,其中对于Helix和Beta结构的影响尤为显著.经DAC、TSA或DAC/TSA联合药物处理2d后,在导致SK-N-SH细胞培养液中Helix结构显著下降的同时,Beta水平较对照组均显著上调(P＜0.05).结论 ①AD病人血清中蛋白二级结构的变化可能与其发病或病理过程有关.②A β25-35的细胞毒性与细胞培养液中Beta构型的增加可能存在一定的关系,并且它们也可能参与了AD的病理过程.③DAC/TSA药物单独作用或二者联合作用,均可引起SK-N-SH细胞培养液中大分子二级结构的改变,这可能与药物或其引起的生理功能的改变有关.