巢式PCR法在日本血吸虫易感水域哨鼠监测中的应用

目的 建立巢式PCR法用以辅助日本血吸虫易感水域中哨鼠的监测.方法 选择日本血吸虫基因组重复序列DNA SjR2(2456～3171 bp)作为外道PCR的区域,其中2719～3019 bp作为内道PCR的扩增区域.以不同稀释度的日本血吸虫成虫基因组DNA为模板进行敏感性测试,并对未感染和感染10条、40条尾蚴的小鼠血清进行检测.将巢式PCR法用于2013年8个哨鼠监测点的监测,观察其应用价值.结果 巢式PCR中内道引物扩增产物为301 bp,血吸虫基因组DNA浓度低至10-5 ng/μl时,仍扩增阳性;以10条和40条尾蚴感染4周的小鼠血清DNA为模板进行巢式PCR,结果为阳性.将巢式PCR用于2013年血吸虫易感水域小范围哨鼠的监测,第2组的20只小鼠中有2只阳性,但解剖小鼠未检出虫体.结论 巢式PCR法可辅助血吸虫易感水域中哨鼠的监测,特别对感染度较低水域的监测有一定帮助.