侵染生姜的黄瓜花叶病毒检测试剂盒的研制

目的:研制出可以检测侵染生姜的黄瓜花叶病毒试剂盒.方法:先采用RT-PCR法检测侵染生姜的黄瓜花叶病毒和烟草花叶病毒,选择仅仅含黄瓜花叶病毒的生姜叶片,采用均浆和高速离心的方法提取黄瓜花叶病毒,通过12％ SDS-PAGE和5％～20％梯度SDS-PAGE二次制备电泳的方法分离出黄瓜花叶病毒的外壳蛋白CP,将含CP的聚丙烯酰胺凝胶磨细后免疫小鼠,获得抗血清.对抗血清进行质量的检测,特异性检查采用Western blot方法,结合性采用ELISA方法,合格抗血清通过亲和层析获得IgG,经过浓缩、透析后与甘油混合获得试剂盒.结果:抗血清中的IgG仅仅与黄瓜花叶病毒的CP结合,抗血清中的IgG能够结合天然黄瓜花叶病毒颗粒.结论:该试剂盒能够检测生姜叶片中的黄瓜花叶病毒.