胶原酶分离及低速离心结合筛网过滤法纯化子宫内膜细胞的研究

目的:探索分离子宫内膜细胞以及纯化子宫内膜腺上皮细胞与间质细胞的最佳方法.方法:采用Ⅰ型胶原酶、胰酶、Ⅰ型胶原酶混合胰酶以及机械研磨等4种方法处理大鼠子宫,比较细胞数和活细胞率,从而获得分离子宫内膜组织的最佳方法.用获得的最佳方法分离人类子宫内膜组织,比较采用2次筛网过滤(筛网法)和低速离心结合筛网过滤(结合法)进一步纯化子宫内膜腺上皮细胞和间质细胞获得的细胞数和纯化效率,从而获得较好的纯化方法.结果:Ⅰ型胶原酶、胰酶、Ⅰ型胶原酶混合胰酶和机械研磨处理大鼠子宫组织所得的细胞数分别为6.43±3.55×105/ml、4.59±2.35×105/ml、4.25±1.06×105/ml、3.57±1.15×105/ml,差异有统计学意义(P＜0.05);活细胞率分别为98.90±0.74％、96.63±1.84％、97.97±2.02％、97.20±4.41％,差异无统计学意义(P＞0.05).筛网法和结合法纯化分离所获得的腺上皮细胞数为0.43±0.21×l05/ml、8.27±2.46×10 5/ml;间质细胞纯度为92.94±2.89％和99.19±0.24％,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:Ⅰ型胶原酶是分离子宫内膜细胞的最佳方法,而采用低速离心结合筛网过滤法是较理想的纯化分离后的子宫内膜细胞的方法.