检测破伤风类毒素的酶联免疫吸附法的建立及应用

目的：建立定量检测白喉‐破伤风‐无细胞百日咳疫苗生产过程中破伤风类毒素（tetanus toxoid ，TT ）的方法。方法 TT 免疫家兔以制备高效价血清抗 TT 抗体。辛酸‐硫酸铵沉淀法纯化抗TT 多克隆抗体并进行辣根过氧化物酶标记，建立双抗体夹心 ELISA 法。结果建立的 ELISA 法与丝状血凝素、百日咳毒素及白喉类毒素无交叉反应，特异性较好。该 ELISA 法在0．5～16．0 Lf ／L TT 检测区间有最佳线性，决定系数＞0．99。实验内和实验间检测14．0、12．0、6．0、3．0和1．5 Lf／L TT ，变异系数为4．7％～9．8％，回收率为92．7％～109．0％，精密度和准确度均符合常规质控要求。该法的定量下限为1．5 Lf／L TT 。结论建立的 ELISA 法可有效检测破伤风疫苗纯化过程中的 TT 含量，为破伤风疫苗质量控制奠定了基础。