姬松茸凝集素的分离纯化及性质

凝集素是一类能够识别特异性糖并与之非共价结合的蛋白或糖蛋白,因其具有特定的识别受体,故在免疫系统和发育过程中发挥了重要的作用.使用DEAE-Sepharose FF弱阴离子交换层析、SP-Sepharose强阳离子交换柱层析、Sephadex G 75分子筛凝胶层析对姬松茸凝集素进行分离纯化,研究理化因素对其凝血活性的影响及其抗菌活性.结果表明:纯化的样品经SDS-PAGE电泳分析得到单一条带,姬松茸凝集素是含有2个相同亚基的同源二聚体,其分子量都为1.20×105.纯化后的姬松茸凝集素相对粗提液的回收率为28.99％,纯化倍数为19.06倍.姬松茸凝集素对热有较好的耐受性,但温度为90℃时失去凝血活性;在强酸或强碱下丧失活性,最适pH为7～9;凝集活性不受金属离子的影响;葡萄糖是其专一性结合糖.姬松茸凝集素对褐腐菌的生长起到了明显的抑制作用,而对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、绿色木霉、西瓜枯萎病菌和黑曲霉的生长没有明显的影响.