肠道病毒71型灭活疫苗灭活验证超速离心条件的优化

目的 优化肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)灭活疫苗灭活验证超速离心条件,为EV71灭活疫苗灭活验证样品的处理提供实验依据.方法 在不同转速(45 000、40 000、35 000、30 000、25 000 r/min)和时间(120、90、60、30 min)条件下对EV71收获液进行超速离心,检测离心前和离心后病毒液的滴度,计算回收率,比较不同条件下离心前后病毒回收效果.结果 在转速相同或离心时间相同的条件下,EV71的沉淀效果与离心时间或离心转速呈正相关(R2从0.77和0.88分别增大到0.99),其中,当离心转速超过40 000 r/min时,不同离心时间下病毒的回收率均在90％以上,当离心时间为120 min,离心转速为45 000 r/min时,病毒的沉淀效果最好,回收率最高,达98％.综合离心时间因素,选择离心条件为45 000 r/min-60 min较适宜(回收率为97％),与45 000 r/min-120 min相比,差异无统计学意义(P＞ 0.05);如将时间减为45 000 r/min-30 min,与其他3组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 EV71的沉淀效果与离心转速和离心时间呈正相关,即随着离心转速增大和离心时间的延长,病毒的沉淀效果越好、回收率越高.