肝细胞生长因子通过促进内源性干细胞增殖治疗大鼠肝硬化的研究

目的 探讨不同剂量肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)促进内源性干细胞增殖治疗肝硬化的疗效.方法 通过腹腔注射50％四氯化碳橄榄油溶液构建肝硬化模型,100只模型大鼠随机分成四个实验组:分别为腹腔注射HGF低剂量组、中剂量组、高剂量组以及空白对照组,采用血清学检测比较四个实验组大鼠丙氨酸氨基转移酶(alanine transaminase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate transaminase,AST)、白蛋白(albumin,ALB)以及总胆红素(total bilirubin,TBIL)水平来评估肝脏功能,应用RT-PCR、Western blot、免疫组织化学检测ALB、角蛋白18(cytokeratin 18,CK18)、肝细胞核因子-4α(hepatocyte nuclear factor-4α,HNF-4α)蛋白变化,评估肝细胞增殖情况.通过EdU荧光标记内源性干细胞,评估其向肝样细胞分化情况.结果 血清学检测表明治疗第4周各治疗组较空白对照组AST、ALT、TBIL均有显著降低,中剂量组与低剂量组之间差异具有统计学意义(均P<0.05).ALB各治疗组于第4周均较对照组显著升高,且各治疗组间差异具有统计学差异(均P<0.05).免疫组织化学、RT-PCR、Western blot半定量分析表明HNF-4α、ALB以及CK18蛋白表达在中、高剂量组与对照组及低剂量组之间差异具有统计学差异(均P<0.05).免疫荧光半定量分析,中、高剂量组ALB、CK18蛋白阳性细胞数与对照组及低剂量组相比,差异均具有统计学意义(均P<0.05).结论 多次反复腹腔注射HGF可促进内源性干细胞增殖并缓解大鼠肝硬化,且最佳腹腔注射剂量为20 mg/kg/d.