新疆雪莲水孔蛋白sikPIP1基因的克隆与功能分析

利用PCR技术从已建立的新疆雪莲cDNA文库中克隆雪莲水孔蛋白基因sikPIP1，构建植物表达载体pBI121-sikPIP1，利用农杆菌介导法获得转基因烟草，PCR和RT-PCR检测证明该基因成功导入并得以转录，并对检测结果均为阳性的植株通过水分胁迫和温度胁迫进行抗旱性和抗寒性分析。结果显示：（1）克隆得到长为880 bp，具有水孔蛋白特性的sikPIP1基因，完整ORF为840 bp。（2）水分胁迫中，断水7 d后转基因烟草生长表型明显优于野生型烟草，生理指标测定结果显示，转基因烟草的相对电导率和丙二醛含量均低于野生型烟草，相对含水量高于野生型烟草。（3）不同温度胁迫处理，转基因烟草表型显著优于野生型，特别是0℃以下低温胁迫，野生型烟草出现严重的萎蔫，而转基因烟草受伤害程度较轻；生理指标结果显示转基因烟草相对电导率、丙二醛含量低于野生型烟草。结果表明，转sikPIP1基因提高了烟草抗旱能力和抗寒能力。