蓝舌病病毒15型VP2蛋白单克隆抗体的制备及其抗原表位鉴定

为制备抗蓝舌病病毒(BTV) 15型VP2蛋白的单克隆抗体(MAb)及鉴定其抗原表位,本研究利用原核表达系统表达的重组VP2蛋白纯化后免疫BALB/c小鼠,将其脾细胞与SP2/0细胞进行融合,并以Bac-to-Bac昆虫杆状病毒表达系统表达并纯化的重组VP2蛋白为包被抗原,通过间接ELISA筛选出一株稳定分泌抗BTV15 VP2蛋白的MAb (2D6).通过western blot和间接免疫荧光试验对该MAb进行特异性鉴定.结果显示,其仅能够识别BTV15,而不能识别其他血清型BTV以及同种属的中山病毒和茨城病毒,表明该MAb具有良好的反应特异性.利用肽扫描技术对该MAb针对的B细胞表位进行鉴定,确定该MAb识别的抗原表位为15IAPAIIK RYP24.本研究为BTV15特异性抗原检测方法的建立奠定了基础.