Clade 2.3.2e H5亚型禽流感DNA疫苗的免疫保护效力研究

为研制和更新针对H5亚型禽流感病毒(AIV)流行株的DNA疫苗,本研究将新近分离的H5亚型AIV Clade2.3.2e分支代表株A/Duck/Anhui/S 1246/2015 (DK/AH/S1246/15)密码子优化的HA基因定向克隆至载体pCAGGS中构建重组质粒pCA-S1246,将该质粒转染293T细胞.利用间接免疫荧光和western blot检测,结果显示,HA蛋白可以在293T细胞中正确表达.将15 μg、30 μg和60μg的pCA-S1246质粒分别免疫3周龄的SPF鸡,3周以后以相同的剂量加强免疫后1周,检测其HI抗体平均效价分别可达1∶56、1∶16和1∶37;加强免疫1周后用105 EID50的DK/AH/S1246/15进行攻击时,免疫组的保护率为100％.本研究为DNA质粒pCA-S1246作为防控Clade.2.3.2e AIV的候选DNA疫苗株提供了实验依据.