质粒转染比例对人乳头瘤病毒16/18型假病毒制备的影响

高危型人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)的持续感染与宫颈癌、阴道癌、口腔癌等恶性疾病的发生相关,目前主要通过基于L1蛋白的HPV疫苗进行预防.而假病毒(Pseudovirus,PsV)的高效稳定生产是相关预防性疫苗免疫保护性评价的重要环节.为初步探究PsV生产过程中各质粒的配比关系对不同型别PsV制备的影响.本实验采用人乳头瘤病毒的16型(HPV16)和18型(HPV18)两种型别的相应质粒转染细胞,编码L1蛋白的质粒转染质量固定为10μg,分别改变编码L2蛋白质粒与EGFP报告质粒的转染比例,通过计算PsV的TCID50值、测定L1蛋白含量以及PsV的感染率对不同质粒转染配比下的假病毒进行评估.结果 显示在HPV16PsV模型中,L1与L2转染质量比为10μg∶2μg时,可以得到TCID50较高的PsV,而当HPV18 PsV达到最大TCID50时,L1与L2的配比为10μg: 1μg,其TCID50略大于10μg: 2μg组;L1与L2比例为10μg: 2μg时两种PsV皆可达到最大感染率;PsV模型对EGFP配比变化并不如L2敏感,L1与EGFP质量比在0.5～1之间时两种PsV均可获得较高TCID50,然而EGFP配比改变造成的感染率差异并不具有统计学意义.本研究探究了HPV16、HPV18 PsV生产的一般规律,为其他型别PsV高效生产提供指导,继而为疫苗保护性评价及结构生物学样品制备奠定基础.