悬浮培养瑞香狼毒不定芽过程中黄酮和香豆素类物质的累积

本文以瑞香狼毒不定芽为材料,研究了在250 mL培养瓶悬浮培养过程中,影响其生长及活性物质(伞形花内酯、东莨菪内酯、总黄酮)积累的四类因子(蔗糖浓度、培养基强度、接种量、接种长度),初步建立了不定芽的悬浮培养体系.在此基础上,研究了3L生物反应器内,影响不定芽生长及活性物质积累的因素(蔗糖浓度、6-BA浓度、初始接种量).结果 显示,不定芽在250 mL培养瓶中悬浮培养周期是15d,最佳蔗糖浓度、培养基强度、接种量、接种长度分别是30g·L-1、MS培养基、1.0g、3 cm.在此培养条件下,不定芽中伞形花内酯、东莨菪内酯和黄酮累积量都在15d达到最大值,分别为0.351、0.035和2.459 mg.3L生物反应器内不定芽悬浮培养周期为24 d,最佳培养条件为蔗糖30 g·L-1、6-BA 0.5 mg·L1和初始接种量15 g.此条件下,伞形花内酯、东莨菪内酯和黄酮累积量分别为6.041、0.763和51.334 mg.本研究建立了瑞香狼毒不定芽的小型生物反应器培养体系,为进一步大规模培养,高效生产上述三种活性物质奠定了基础.