黄体生成素受体对睾丸间质干细胞增殖分化的影响

目的 探讨黄体生成素受体(LHCGR)对睾丸间质干细胞(SLC)增殖及分化能力的影响.方法 采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及免疫荧光染色比较LHCGR-/-小鼠与LHCGR+/+小鼠睾丸内SLC标志物的表达情况.通过流式细胞术分选出SLC,进行5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(EdU)及CCK-8增殖实验.同时诱导SLC向睾丸间质细胞(LC)分化,14 d后检测上清液睾酮水平.qRT-PCR及免疫荧光检测诱导分化后LC标志物表达水平.结果 LHCGR-/-小鼠睾丸内存在SLC,应用CD51标记并通过流式分选可获得SLC.LHCGR-/-小鼠SLC EdU+细胞比例和CCK-8增殖曲线与LHCGR+/+小鼠比较差异均无统计学意义(P均>0.05).LHCGR-/-小鼠SLC诱导分化后培养基上清液睾酮平均水平仅为0.01 ng/ml,低于LHCGR+/+对照组的2.71 ng/ml(P<0.001),其诱导分化后细胞LC标记物的表达也低于LHCGR+/+小鼠(P均<0.001).结论 敲除LHCGR基因后,睾丸内存在SLC且能维持正常的增殖活性,但是分化为LC受阻.