BMP-9在胆道闭锁肝纤维化中的作用机制研究

目的 探讨骨形态发生蛋白9(BMP-9)在胆道闭锁(BA)肝纤维化中的作用机制.方法 选取14例BA患儿肝组织标本为BA组,5例胆总管囊肿(CBD)患儿肝组织标本为CBD组,HE染色对肝组织进行肝纤维化评估,免疫组化染色检测BMP-9、p-SMAD1/5表达情况,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qPCR)检测肝组织BMP-9及DNA结合抑制因子1(ID1)mRNA表达水平.培养人肝星状细胞LX-2,用重组转化生长因子(rTGF)-β1与重组BMP(rBMP)-9处理,蛋白质印迹法检测细胞中SMAD1/5、p-SMAD1/5、ID1蛋白及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达情况,qPCR检测细胞中α-SMA及ID1 mRNA表达情况.结果 BA组肝组织中BMP-9及p-SMAD1/5蛋白、BMP-9及ID1 mRNA表达水平均高于CBD组;在BA组中重度肝纤维化患儿BMP-9蛋白、BMP-9及ID1 mRNA的表达高于轻度肝纤维化患儿(P<0.05).LX-2细胞经rTGF-β1、rBMP-9处理后,α-SMA蛋白及α-SMA mRNA表达水平均升高(P<0.05).LX-2细胞加入不同剂量rBMP-9之后,其下游通路中p-SMAD1/5、SMAD1/5、ID1、α-SMA蛋白,及ID1、α-SMA mRNA表达均较0μg/L组升高(P<0.05).结论 在BA患儿肝组织中BMP-9、p-SMAD1/5、ID1表达水平较CBD患儿增高,与肝纤维化严重程度有关.BMP-9可通过SMAD/ID1信号通路激活人肝星状细胞LX-2,促进纤维化进程.