基于乏氧环境的生物靶向载药纳米粒诊疗乳腺癌的实验研究

目的 探讨生物靶向载药纳米粒基于乏氧微环境诊疗乳腺癌的效果.方法 采用薄膜水化法制备载全氟己烷(perfluorohexanes,PFH)和替拉扎明(tirapazamine,TPZ)的LPT纳米粒.培养双歧杆菌,检测基本表征.利用静电吸附法连接菌和纳米粒以制备生物靶向载药纳米粒,激光共聚焦、流式细胞术检测二者连接情况.超声诊断仪、MTT[3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide]法、流式细胞术检测纳米粒经HIFU(high-intensity focused ultrasound)辐照后体外超声成像以及杀伤乳腺癌细胞效果;组织匀浆法检测双歧杆菌靶向肿瘤能力,活体荧光成像观察纳米粒靶向肿瘤情况.建立4T1乳腺癌小鼠模型,随机分为靶向组和非靶向组(n=3)观察纳米粒体内超声成像效果;体内治疗时随机分空白对照组、PBS+HIFU组、LPT+HIFU组、LPT+双歧杆菌+HIFU组(n=3),记录小鼠体质量和肿瘤体积变化,14 d后行HE染色.结果 成功制备生物靶向载药纳米粒.LPT纳米粒粒径(218.93±6.56) nm、电位(55.00±4.97) mV,双歧杆菌电位(-28.10±7.52)mV,二者连接率为(99.04±0.40)％.HIFU辐照后纳米粒具有较好超声成像效果.MTT及流式细胞术检测结果显示与常氧组相比,纳米粒在乏氧条件下对乳腺癌细胞具有较好杀伤效果(P＜0.05).组织匀浆结果验证双歧杆菌可靶向肿瘤组织,活体荧光成像显示纳米粒富集在肿瘤部位.靶向组纳米粒经HIFU辐照后实现了体内超声成像,比较各组肿瘤体积以及HE切片结果,LPT+双歧杆菌+HIFU组抑瘤效果最明显(P＜0.05).结论 基于乏氧微环境的生物靶向载药纳米粒能有效诊疗乳腺癌,为乳腺癌诊疗一体提供新思路.