液相色谱结合液质联用法测定酮康唑原料药及复方酮康唑软膏中的有关物质

目的 建立一种复方酮康唑软膏中有关物质的液相色谱及液相色谱质谱测定方法.方法 采用Agilent HPLC,选择ZORBAX Eclipse Plus C18色谱柱(250mm×4.6mm,5mm),以10mmol/L四丁基硫酸氢铵溶液-乙腈(85∶15)为流动相A,10mmol/L四丁基硫酸氢铵溶液-乙腈(20:80)为流动相B,流速为1mL/min,检测波长为220nm.经优化流动相比例确定了线性梯度洗脱,开展了专属性、线性、准确度、精密度、重复性、稳定性和耐用性等方法学研究.并将该方法应用于酮康唑原料药及复方酮康唑软膏中有关物质的检测.在液相色谱-四级杆飞行时间质谱方法中,选择0.1％甲酸水溶液为流动相A,乙腈为流动相B,梯度洗脱,通过二级质谱数据推导了酮康唑的裂解规律.结果 通过检测酮康唑原料药、复方酮康唑软膏并结合降解实验结果发现,酮康唑与相邻杂质均可实现基线分离.根据确定的HPLC方法对比了不同来源复方酮康唑软膏有关物质的差异.建立了基于高分辨质谱的酮康唑及其杂质的结构解析方法,修正了酮康唑及杂质E的特征子离子的产生过程及结构,并确认了酮康唑的主要降解杂质为杂质D.结论 本方法灵敏度较高、重复性较好,为复方酮康唑软膏的质量控制提供了一种可行的分析方法,适用于该产品的质量控制.基于高分辨质谱的结构解析方法也为酮康唑中其他杂质的结构推断提供了研究基础.