抑制NEK7促进肝癌细胞凋亡的实验

目的 采用体外实验验证抑制NEK7表达后肝癌细胞增殖、衰老及凋亡的变化,并探索其机制.方法 Western blot及RT-PCR检测不同肝癌细胞系及人肝永生化THLE-2细胞系中的NEK7表达,针对NEK7基因序列设计抑制其表达的shRNA,转染肝癌细胞后,观察细胞体外增殖活性、衰老、凋亡及细胞周期的变化,Western blot检测抑制NEK7表达后细胞周期相关因子的变化.结果 肝癌细胞中NEK7呈高表达,shRNA慢病毒转染肝癌细胞抑制NEK7表达后,肝癌细胞增殖能力受到抑制,细胞衰老及凋亡比例显著升高,S及G2/M期细胞数明显减少,细胞周期受到阻滞, C-myc、c-Fos、cyclin D1、cyclin E等细胞周期因子表达水平受到抑制,P16及P27表达水平升高, CDK2、CDK4及CDK6的表达无明显变化.结论 靶向抑制NEK7表达,降低了肝癌细胞的增殖能力,并促进细胞衰老、诱导其凋亡,同时肝癌细胞周期进程受阻.