Clip170和Clasp1在小鼠神经系统中的表达及在自噬中作用

目的 探讨微管正端示踪蛋白Clip170和Clasp1在小鼠神经系统中表达分布以及在细胞自噬蛋白降解通路中的作用.方法 以1.5个月龄C57BL/6J野生型小鼠为材料,使用蛋白印迹(Western blot)检测Clip170和Clasp1在小鼠眼、脑、脊髓和坐骨神经中表达情况,以HEK293细胞为材料,使用转染和Western blot法分别检测HEK293细胞中Clip170和Clasp1缺失对于自噬通路中关键蛋白的影响.结果 Clip170和Clasp1在小鼠神经系统中表达广泛,且与脊髓相比,坐骨神经中两者含量均显著下降(P＜0.05).在HEK293细胞中敲减Clip170蛋白可引起使自噬通路中p62和LC3B-Ⅱ蛋白表达水平显著提高(P＜0.05),而LC3B-Ⅰ蛋白含量未发生明显变化(P＞0.05).HEK293细胞中敲减Clasp1蛋白可引起使自噬通路中p62蛋白表达水平极显著下降(P＜0.05),LC3B-Ⅱ蛋白显著提高,LC3B-Ⅰ蛋白含量未发生明显变化(P＞0.05).结论 微管正端示踪蛋白Clip170和Clasp1在小鼠神经系统广泛表达,但具有组织区域差异性.Clip170和Clasp1含量下降可能通过破坏自噬小体的形成或运输引起自噬通路异常.