CXCR6通过WNT/β-catenin通路促进结直肠癌增殖和侵袭

目的 检测CXCR6基因在结直肠癌(CRC)中的表达,分析其通过WNT/β-catenin通路促进增殖和侵袭对CRC的影响及作用机制.方法 收集2017-10-01-2019-09-01于河北医科大学第四医院手术的68例CRC患者(结肠癌48例、直肠癌20例)癌及癌旁组织(≥3 cm)标本,应用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测肿瘤组织CXCR6 mRNA的表达,分析CXCR6与患者的临床病理特征关系.进一步细胞实验应用蛋白质印迹法检测结肠癌SW620细胞株中CXCR6表达,应用RNA干扰技术构建siRNA-CXCR6转染SW620细胞株,噻唑蓝(MTT)实验检测细胞活性,Tran-swell小室实验检测侵袭能力,蛋白质印迹法检测Wnt/β-catenin通路关键因子的表达.使用Wnt/β-catenin信号通路激活剂LiCl处理SW620细胞,检测抑制CXCR6表达同时激活Wnt/β-catenin信号通路对细胞活性和侵袭能力的影响.结果 CRC患者肿瘤组织CXCR6 mRNA表达水平(3.743±0.861)高于癌旁组织(0.920±0.145),差异有统计学意义,t=26.662,P<0.001.CRC患者临床分期晚(t=-2.190,P=0.032)、分化程度低(t=-3.674,P<0.001)和淋巴结转移阳性(t=-4.360,P<0.001)的患者肿瘤组织CXCR6 mRNA表达水平较高.CXCR6在SW620细胞株中呈高表达(F=26.521,P<0.001).转染后siRNA-CXCR6组细胞活性在48 h(F=5.793,P=0.014)和72 h(F=13.892,P<0.001)降低;细胞侵袭能力下降(F=17.364,P<0.001);Wnt/β-catenin通路关键因子p-GSK3βser9(F=19.944,P=0.002)、核β-catenin(F=45.404,P<0.001)、转录因子4(TCF4,F=26.095,P=0.001)、c-myc(F=11.139,P=0.010)、CyclinD1(F=21.327,P=0.002)和基质金属蛋白酶9(F=20.934,P=0.002)表达均下降.LiCl处理SW620细胞可促进细胞活性和侵袭能力(F值分别为41.025和24.207,均P<0.001).结论 CRC肿瘤组织及SW620细胞系CXCR6高表达,其可能通过调控Wnt/β-catenin通路促进CRC细胞增殖和侵袭.