瑞舒伐他汀对晚期糖基化终产物修饰的低密度脂蛋白诱导肥大细胞活化的影响及其机制

目的 探讨瑞舒伐他汀对晚期糖基化终产物修饰的低密度脂蛋白(AGE-LDL)刺激肥大细胞活化的影响及相关分子机制.方法 2019年6月—2020年12月于中国人民解放军海军军医大学中心实验室进行实验.以重组鼠白介素-3(rmIL-3)和重组鼠干细胞因子(rmSCF)体外诱导小鼠骨髓细胞向肥大细胞分化.收集细胞分为Con-trol组(加入PBS)、不同浓度AGE-LDL组(0.5、5、50μg/ml)、n-LDL组、LPS组、不同浓度瑞舒伐他汀组(1、10、50 mmol/L),用不同浓度的瑞舒伐他汀及AGE-LDL预处理分化成熟的肥大细胞,分别用RT-PCR及酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肥大细胞中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素6(IL-6)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)的基因表达和蛋白水平;采用Western-blot法检测瑞舒伐他汀及相关信号通路抑制剂对AGE-LDL刺激的丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路的影响.结果 与Control组比较,AGE-LDL组可呈浓度依赖性地刺激肥大细胞分泌TNF-α、IL-6和MMP-9 mRNA表达,差异具有统计学意义(F=47.050、71.320、574.320,P均=0.000),其中50μg/ml亚组表达量最高,而非糖化低密度脂蛋白(n-LDL)组差异无统计学意义(P>0.05).瑞舒伐他汀能够呈浓度依赖性抑制上述指标mRNA表达(F=63.050、33.610、68.480,P均=0.000),并抑制TNF-α、IL-6、MMP-9分泌(t/P=28.190/0.000、19.900/0.000、19.550/0.000).AGE-LDL能够促进p38、ERK1/2、p65磷酸化(t/P=9.640/0.002、13.380/0.001、6.110/0.001),对JNK磷酸化则无影响(P>0.05);瑞舒伐他汀及ERK1/2抑制剂、NF-κB抑制剂能够下调相应信号通路磷酸化及炎性因子表达(瑞舒伐他汀组:t/P=4.470/0.004、6.330/0.001、3.640/0.011;PD98059组:t=14.500、12.670、18.180,P均=0.000;PDTC组:t=19.140、15.400、23.070,P均=0.000),而p38-MAPK抑制剂则无相应抑制作用(P>0.05).结论 瑞舒伐他汀能够抑制AGE-LDL刺激小鼠骨髓来源肥大细胞(mBMMCs)活化分泌炎性介质,其机制可能与抑制ERK1/2和NF-κB通路有关.