基于网络药理学和体外实验探讨驻景丸治疗老年性黄斑变性的作用机制

目的 运用网络药理学和体外实验探讨驻景丸治疗老年性黄斑变性(AMD)的作用机制.方法 检索Genecards、OMIM数据库与AMD相关的作用靶点,使用Jvenn在线工具获取驻景丸活性成分与AMD的交集靶点,构建"药物-成分-靶点"网络以及蛋白互作(PPI)网络.采用DAVID数据库对交集靶点的GO-功能和KEGG通路富集分析,将网络中度值较高的成分与靶点进行分子对接.通过体外MTT实验和Western Blot实验,使用驻景丸有效成分干预人视网膜色素上皮细胞(ARPE19),进行核心靶点和通路的初步验证.结果 网络药理学结果显示,共筛选出驻景丸中38个活性成分、150个交集靶点.蛋白互作网络显示关键靶点有MAPK1、Akt1、VEGFA等.GO富集分析涉及到247个生物过程、36个细胞组分和64个分子功能.KEGG通路分析得到HIF-1信号通路、PPI3K-Akt信号通路、前列腺癌等85条相关通路.分子对接结果显示驻景丸治疗AMD的主要活性成分可以与MAPK1、Akt1、STAT3和MAPK3有较稳定的结合,其中Akt1与异鼠李素结合性最强.MTT结果显示驻景丸活性成分异鼠李素、槲皮素和山柰酚均可以促进碘酸钠损伤的ARPE19细胞增殖(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.001).Western Blot结果证实碘酸钠通过激活STAT3信号通路诱导细胞凋亡相关蛋白Caspase-3、PARP、BAD表达(P＜0.01,P＜0.001),异鼠李素、槲皮素和山柰酚则可以通过抑制STAT3信号通路进而抑制Caspase-3、PARP、BAD凋亡蛋白表达(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.001).结论 本研究从网络药理学角度预测了驻景丸治疗AMD的药效物质基础及分子机制,并通过体外实验进行核心靶点和通路的初步验证,为驻景丸等中药复方研究提供了新的思路.