听力损失中表达上调的miR-196a-5p靶向抑制Neuritn的表达

目的 筛选鉴定听力损失中上调且靶向调控Neuritin的miRNA.方法 构建CBA小鼠药物性听力损失模型(硫酸卡那霉素+呋塞米),采用高通量测序检测听力损失中差异表达的miRNA.利用生物信息学技术,分析预测靶向Neuritin的miRNA,取测序结果中高表达miRNA与靶向Neuritin的miRNA交集得到候选miRNA.使用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)明确听力损失中候选miRNA高表达,使用miRNA mimics转染293T细胞,观察目标miRNA对Neuritin表达的靶向抑制作用.结果 通过高通量测序与生物信息学分析获得3个在听力损失中表达升高且可能靶向调控Neuritin的候选miRNA,即miR-196a-5p,miR-211-5p和miR-6395.RT-qPCR实验发现miR-196a-5p在小鼠听力损失12h与24h后在Corti器中的均表达升高(P＜0.05);miR-6395在小鼠听力损失后12h表达降低,24h后表达升高(P＜0.05);miR-211-5p在小鼠听力损失后12h与24h表达均降低(P＜0.05).Western Blot实验发现转染miR-196a-5p后293T细胞的Neuritin表达下降(P＜0.05).结论 听力损失中表达上调的miR-196a-5p可靶向抑制Neuritin的表达.