Efeito do tratamento precoce com insulina e sua ação protetora sobre o estresse de retículo endoplasmático na célula beta

O tratamento precoce com insulina e uma alternativa de terapia para pacientes com diabetes mellitus tipo 2 que tem sido testada em diversos ensaios clinicos mostrando como resultado um bom controle glicemico a longo prazo nos pacientes. Por se tratarem de ensaios clinicos, nao se sabe ao certo o mecanismo ativado na celula beta para que ocorra tal melhora no quado de DM2. Ao menos em parte, acreditamos que esta melhora do quadro clinico se deva a reversao do quadro danoso do estresse de reticulo endoplasmatico nas celulas beta, tendo como possiveis mediadores da acao da insulina a interacao das proteinas Grb2 e FAK. Para avaliacao da hipotese, celulas INS1-E foram submetidas a tratamento com insulina (100nM), nos tempos de 1h, 2h e 3h para avaliacao da viabilidade celular, que foi medida por concentracao de ATP, e determinar o tempo de exposicao adequado da celula ao hormonio. Alem disso, as celulas estao sendo submetidas ao estresse de reticulo por meio da administracao de CPA, sendo posteriormente tratadas com insulina, para avaliar se houve reversao do estresse. Ainda, posteriormente, as celulas serao expostas ao siRNA contra Grb2 para avaliar o seu papel na melhora das celulas beta. Western blotting e PCR estao sendo utilizados para avaliar marcadores de estresse, bem como se ha melhora com o tratamento com o hormonio.