外源硫化氢对氧化应激下铜绿假单胞菌生长和生物膜的调节作用

探究外源硫化氢(H2S)对铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PAO1)在氧化应激(H2O2)胁迫条件下的作用.选取硫氢化钠(NaHS)作为外源H2S的供体.将铜绿假单胞菌分为两组;对照组的培养基中不添加NaHS;实验组的培养基中添加0.2 mmol/L NaHS;观察两组菌株在0、1、2、2.5 mmol/L H2O2的压力下存活率、细胞形态、DNA外渗量、生物膜生长的变化情况.研究结果表明,随着时间的推移(从0.5 h到1h再到1.5 h),与对照组菌株相比,实验组菌株的存活率显著降低(p＜0.05),其中在1 mmol/L H2O2的处理下,实验组比对照组显著降低24.83％、15.69％、11.36％;在2mmol/L H2O2的处理下,实验组比对照组显著降低4.92％、11.16％、5.75％;在2.5 mmol/L H2O2的处理下,实验组比对照组降低6.83％、2.98％、0.39％.实验组较对照组相比,细胞形态受损和DNA外渗更加严重.利用结晶紫染色、扫描电子显微镜和激光共聚焦显微镜检测在不同浓度H2O2胁迫下生物膜形成的变化,结果表明,与对照组菌株的生物膜相比,在含有1 mmol/L和2mmol/L H2O2的Luria Bertani(LB)培养基中实验组菌株的生物膜形成在培养48 h和72 h后显著减少.结果 表明,H2S能增强H2O2对铜绿假单胞菌细胞的损伤.