超高效液相色谱-串联质谱法同时快速检测微量血清中6种脂溶性维生素

目的 建立超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)同时快速检测微量血清中维生素A、维生素D(25-OH-VD2、25-OH-VD3)、维生素E(α-、β-和γ-生育酚)的方法.方法 血清中脂溶性维生素经甲醇-乙腈(50:50,v/v)沉淀蛋白、正己烷萃取,以Phenomenex Kinetex F5色谱柱为分离柱,2.5 mmol/L甲酸铵-0.1％甲酸水溶液和甲醇为流动相,梯度洗脱,电喷雾电离(ESI+)、多反应监测(MRM)模式下检测,同位素内标法定量.结果 血清中6种脂溶性维生素线性范围内线性关系良好,相关系数r＞0.995;6种脂溶性维生素的检测限为0.20～1.25 ng/ml,定量限为0.39～3.88 ng/ml;加标回收率为86.6％～107.7％,日内精密度＜9.6％,日间精密度＜9.3％.NIST标准参照品SRM 968f验证方法准确度,结果偏差均在5％以内.结论 本方法准确度高、重现性好、用血量少,适于婴幼儿等采血困难者微量血样中多种脂溶性维生素的同时快速检测.