黄连素对耐多黏菌素大肠杆菌的耐药性逆转和mcr-1基因消减作用

目的 建立黄连素逆转mcr-1阳性大肠杆菌耐药性的方法,为中药抗多重耐药菌感染提供新线索.方法 通过肉汤稀释法分别测定黄连素和氯丙嗪对大肠杆菌EMCRR45的最低抑菌浓度,并以此浓度进行质粒消除实验.利用棋盘培养实验确认耐药质粒的消除,计算消除率,使用SPSS 17.0软件与对照组氯丙嗪组进行消除率比较.利用K-B法或微量肉汤稀释法检测质粒消除前后耐药性的变化.采用荧光定量PCR检测耐药质粒消除前后细菌中mcr-1含量的变化.结果 黄连素和氯丙嗪对大肠杆菌EMCRR45的最低抑菌浓度分别为1.25 mg/ml和68μg/ml,72 h的质粒消除率分别为26.9％和6.0％,差异有统计学意义(P=0.001).质粒消除后,耐受抗生素种类从8种下降至4种,同时逆转了对多黏菌素的耐药性.荧光定量PCR显示,质粒消除后mcr-1的CT值从28.55变为34.50.结论 黄连素可以消减大肠杆菌mcr-1基因,并逆转细菌对多黏菌素的耐药性.