不同基因型弓形虫GRA7重组蛋白的抗原性鉴定及交叉反应原性分析

弓形虫是一种严重危害公共卫生安全的人兽共患寄生原虫.前期研究发现,相对于弓形虫Ⅰ型株(RH株),Chinese Ⅰ型株(YZ-2株)GRA7蛋白因缺失1个谷氨酸而形成新的抗原表位,但该表位对GRA7蛋白免疫学功能的影响尚不清楚.分别对弓形虫RH和YZ-2株GRA7基因进行PCR扩增,构建原核表达载体RH-pET30a(+)-GRA7和YZ-2-pET30a(+)-GRA7,并进行体外诱导表达;Western blot分析2种重组蛋白的抗原性及交叉反应原性.结果 表明:GRA7基因PCR产物大小630～633 bp;体外诱导表达产物大小约37 ku;2种重组蛋白均能被抗His标签单克隆抗体、GRA7重组蛋白制备的鼠多克隆抗体以及弓形虫速殖子可溶性抗原制备的鼠多克隆抗体所识别;同时,用重组蛋白制备的多克隆抗体可交叉识别2种基因型虫体内的GRA7天然蛋白.Ⅰ型和Chinese Ⅰ型虫株的GRA7蛋白具有良好的交叉反应原性,该结果为进一步探索弓形虫GRA7蛋白的功能及其抗感染免疫保护作用的研究奠定基础.