异鼠李素通过抑制泡沫细胞形成增加动脉粥样硬化斑块稳定性的机制研究

背景 泡沫细胞的形成是动脉粥样硬化重要的病理基础,其是由巨噬细胞吞噬大量胆固醇和三酰甘油后转化而来.因此,如何促进巨噬细胞的脂质代谢、抑制其转化为泡沫细胞是延缓动脉粥样硬化病情进展的关键.目的 分析异鼠李素通过抑制泡沫细胞形成增加动脉粥样硬化斑块稳定性的机制.方法 本实验时间为2020年8月至2021年10月.动物实验:将10只雄性C57BL小鼠作为空白对照组(不进行干预);将20只ApoE-/-小鼠随机分为动脉粥样硬化组(采用高脂饲料喂养16周以构建动脉粥样硬化小鼠模型)和动脉粥样硬化+异鼠李素组(采用高脂饲料喂养16周以构建动脉粥样硬化小鼠模型,于高脂饲料喂养第9周开始给予异鼠李素,连续给药8周),每组10只.检测三组小鼠动脉粥样硬化斑块中脂质核心面积百分比、泡沫细胞所占比例.细胞实验:取对数生长期的RAW 264.7巨噬细胞,将其分为空白对照组(不进行干预)、氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)干预组(采用ox-LDL干预24 h以体外诱导泡沫细胞形成)、ox-LDL+异鼠李素干预组(采用异鼠李素孵育8 h,之后采用ox-LDL干预24 h以体外诱导泡沫细胞形成),检测各组巨噬细胞中SIRT6表达水平.取对数生长期的RAW 264.7巨噬细胞,将其分为空白对照组(不进行干预)、ox-LDL组(采用ox-LDL干预24 h以体外诱导泡沫细胞形成)、ox-LDL+异鼠李素组(采用异鼠李素孵育8 h,之后采用ox-LDL干预24 h以体外诱导泡沫细胞形成)、ox-LDL+异鼠李素+Ad-sh-SIRT6组〔采用异鼠李素孵育8 h,转染Ad-sh-SIRT6腺病毒以干扰SIRT6的表达,12 h后用ox-LDL干预24 h以体外模拟动脉粥样硬化状态〕,检测各组巨噬细胞中脂滴数目.结果 动物实验:动脉粥样硬化+异鼠李素组小鼠动脉粥样硬化斑块中脂质核心面积百分比低于动脉粥样硬化组(P<0.05).动脉粥样硬化组小鼠动脉粥样硬化斑块中泡沫细胞所占比例高于动脉粥样硬化+异鼠李素组(P<0.05).细胞实验:ox-LDL干预组、ox-LDL+异鼠李素干预组巨噬细胞中SIRT6表达水平低于空白对照组(P<0.05);ox-LDL+异鼠李素干预组巨噬细胞中SIRT6表达水平高于ox-LDL干预组(P<0.05).ox-LDL组、ox-LDL+异鼠李素组、ox-LDL+异鼠李素+Ad-sh-SIRT6组巨噬细胞中脂滴数目多于空白对照组(P<0.05);ox-LDL+异鼠李素组巨噬细胞中脂滴数目少于ox-LDL组(P<0.05);ox-LDL+异鼠李素+Ad-sh-SIRT6组巨噬细胞中脂滴数目多于ox-LDL组、ox-LDL+异鼠李素组(P<0.05).结论 异鼠李素通过上调SIRT6表达水平,减少巨噬细胞中脂滴数目,抑制动脉粥样硬化斑块中泡沫细胞形成,缩小动脉粥样硬化斑块中脂质核心面积,进而增加动脉粥样硬化斑块稳定性.