7-羟基黄烷酮抑制大鼠生长板软骨细胞凋亡及对胫骨生长的影响

目的 筛选7-羟基黄烷酮抑制大鼠生长板软骨细胞凋亡的最适药物浓度并观察其对大鼠骨骺闭合和胫骨生长的影响.方法 解剖大鼠胫骨生长板软骨,体外分离生长板软骨细胞并进行鉴定.然后采用IL-1β诱发软骨细胞凋亡,分别加入含有10、20、40、60 μM的7-羟基黄烷酮培养液进行培养,采用MTT法初步观察各浓度抑制软骨细胞凋亡效果,筛选出最佳药物浓度.随后采用流式细胞仪对筛选出的最佳浓度进行验证.此外给予大鼠100 mg/kg 7-羟基黄烷酮灌胃,观察其对骨骺闭合及胫骨生长的影响.结果 软骨细胞免疫荧光鉴定结果显示,分离培养的细胞符合软骨细胞的生物学特征.MTT法实验结果显示,10、20、40、60μM7-羟基黄烷酮均可以不同程度地抑制生长板软骨细胞凋亡,其中抑制软骨细胞凋亡的最佳药物浓度为40 μM,通过流式细胞仪进一步验证显示40 μM 7-羟基黄烷酮抑制细胞凋亡作用明显,且效果优于阳性对照组.此外,100 mg/kg 7-羟基黄烷酮灌胃结果显示其能够延缓骨骺闭合并促进大鼠胫骨生长.结论 本次研究结果显示,7-羟基黄烷酮能够抑制大鼠生长板软骨细胞凋亡,最适药物浓度为40 μM.此外,体外实验证实给予大鼠灌胃7-羟基黄烷酮的确能够延缓骨骺愈合,促进胫骨生长.