红景天苷调控KLF4/eNOS信号抑制Hcy诱导内皮-间质转分化的作用

目的 基于KLF4/eNOS信号,研究红景天苷(salidro-side,SAL)对同型半胱氨酸(Hcy)诱导内皮细胞间质转分化(EndMT)的作用及机制.方法(1)研究SAL对Hcy诱导EndMT的作用.不同剂量SAL预处理后,给予Hcy(1 mmol·L-1)共孵育48 h诱导EndMT.采用Western blot检测VE-cadherin、α-SMA、KLF4及eNOS的蛋白水平,划痕修复实验检测细胞迁移能力,硝酸还原酶法检测细胞内NO水平,细胞免疫荧光技术检测KLF4表达及定位.(2)基于KLF4/eNOS信号,研究SAL抑制EndMT的信号机制.采用siRNA技术实现细胞内KLF4的沉默,Western blot检测VE-cadherin与α-SMA,KLF4及eNOS的蛋白水平.结果(1)SAL上调Hcy诱导的VE-cadherin及下调α-SMA的表达,降低细胞迁移能力,上调eNOS/NO信号轴水平,并抑制KLF4的表达及向胞核转位.(2)沉默KLF4可下调 α-SMA及KLF4的表达,上调VE-cadherin和eNOS的表达.与SAL+siKLF4组比较,SAL组及siKLF4组对表型标志物的作用无明显差异.结论 SAL抑制Hcy诱导的EndMT,其作用与调节KLF4/eNOS信号途径有关.