草鱼Hsp27基因的克隆、分析及摄食蚕豆对其表达的影响

热休克蛋白27 (Hsp27)是一种小分子热休克蛋白,具有分子伴侣性质,能够与肌动蛋白结合,从而调节肌动蛋白细胞骨架重组.本试验通过cDNA末端快速扩增法(RACE)获得草鱼Hsp27基因全长序列,进行氨基酸序列预测,蛋白质特征分析,以及Hsp27基因的组织差异表达,并检测了草鱼摄食蚕豆过程中Hsp27基因表达量的变化.结果 表明:草鱼Hsp27基因cDNA序列全长1 271 bp,含417 bp的5'端非编码区、317 bp的3'端非编码区和537 bp的开放阅读框,编码178个氨基酸.所编码的氨基酸序列与鲫鱼(Carassius auratus)、斑马鱼(Danio rerio)、斑点叉尾鮰(Ietalurus punetaus)和墨西哥脂鲤(Astyanax mexicanus)的同源性分别达83％、76％、75％、70％.草鱼Hsp27蛋白分子质量为19 501.39 Da,含178个氨基酸残基,理论等电点为6.20,为亲水性蛋白,不含信号肽;其二级结构和三级结构显示有螺旋和折叠.草鱼Hsp27基因在肝脏、脾脏、脑、肾脏、鳃、肌肉、心脏、皮肤、前肠、血液中均有表达,在心脏和肌肉组织中高表达,肾脏组织表达量最低(p＜0.05).相比对照组,摄食蚕豆后草鱼心脏组织和肌肉组织Hsp27基因的表达量显著升高,表明蚕豆促进了Hsp27的表达,所得结果为后续研究蚕豆脆化草鱼肌原纤维变化的分子机理奠定基础.