丹参茉莉酸羧甲基转移酶的原核蛋白表达分析

茉莉酸羧甲基转移酶基因(jasmonic acid carboxyl methyltransferase,JMT)是植物茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)生物合成过程中的关键酶基因,在植物体内可依赖S-腺苷-蛋氨酸(S-adenosyladenyl-L-methionine,SAM)作为甲基供体,催化茉莉酸(jasmonic acid, JA)形成茉莉酸甲酯.本研究将丹参茉莉酸羧甲基转移酶基因eDNA构建到原核表达载体PET-28a(+)上后转化到大肠杆菌BL21 (DE3)并加入异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达.SDS-PAGE凝胶电泳检测结果表明该蛋白的分子量大小约44kD,与预测的蛋白分子质量大小一致,从而证实丹参JMT基因在大肠杆菌中表达成功.丹参JMT基因在原核细胞表达将对此酶基因的蛋白纯化、体外酶活力检测以及基因功能等研究奠定一定的基础.