枯草芽胞杆菌异戊二烯酶ComQ的生物信息学分析及对生物膜形态的影响

[目的]枯草芽胞杆菌ComQ是一种类异戊二烯生物合成酶.利用生物信息学预测分析了ComQ的生物学特性,对comQ基因进行过表达和敲除,构建突变菌,孔板发酵培养验证生物膜形态变化.[方法]运用NCBI (National Center for Biotechnology Information)网站里的Protein数据库获取ComQ蛋白氨基酸序列,通过在线生物信息学软件预测分析其生物学特征,包括其理化性质、信号肽、结构域、空间结构等.构建枯草芽胞杆菌BS168的comQ过表达及敲除菌株,利用孔板发酵培养验证生物膜生长性状.[结果]ComQ蛋白由299个氨基酸组成,理论相对分子质量约34204.08 Da,无信号肽,无跨膜区,为稳定胞内蛋白.通过菌落PCR,验证枯草芽胞杆菌BS168突变菌构建成功.利用孔板发酵培养枯草芽胞杆菌BS168及突变菌株,验证ComQ蛋白对枯草芽胞杆菌生物膜的形态形成存在影响.两种突变菌株生物膜形态均与原始菌株存在差异.[结论]通过对ComQ蛋白的基本性质、关键氨基酸位点及蛋白结构预测分析,构建突变菌株,验证生物膜形态变化,为后续探究ComQ对枯草芽胞杆菌的生长代谢变化奠定了基础.