不同时长氧糖剥夺对大鼠原代皮层神经元-小胶质细胞共培养体系的影响

目的:探讨不同时长氧糖剥夺(OGD)对大鼠原代皮层神经元-小胶质细胞共培养体系的影响.方法:提取新生SD大鼠原代皮层神经元及小胶质细胞,经免疫荧光法鉴定细胞纯度达到95％以上,可用于建立大鼠原代皮层神经元-小胶质细胞共培养体系并进行OGD处理;分别设置空白对照组、氧糖剥夺0.5h、1h、2h、4h组,除空白对照组不进行OGD处理,其余各组分别OGD处理0.5、1、2、4h;复糖复氧24 h后,比色法检测上清中乳酸脱氢酶(LDH)含量,TUNEL法检测细胞凋亡率,免疫荧光法检测离子钙结合衔接分子1(Iba1)阳性细胞数,ELISA法检测上清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量.结果:与空白对照组相比,氧糖剥夺4h组细胞凋亡率、Iba1阳性细胞率无显著性差异;氧糖剥夺0.5h组、1h组和2h组中的LDH含量、细胞凋亡率、Iba1阳性细胞数及TNF-α含量均明显增多(P＜0.05或P＜0.01).与氧糖剥夺2h组相比,氧糖剥夺0.5h组中的LDH含量及TNF-α含量明显降低;氧糖剥夺1h组中TNF-α含量明显降低(P＜0.05或P＜0.01).结论:大鼠原代皮层神经元-小胶质细胞共培养体系经OGD处理2h可较好模拟缺血性脑损伤后两细胞的相互作用.