蛇毒半胱氨酸蛋白酶抑制剂重组蛋白诱导肿瘤细胞体内外凋亡及其分子机制

目的 探讨蛇毒半胱氨酸蛋白酶抑制剂(snake venom cystatin,sv-cystatin)重组蛋白对肿瘤细胞凋亡的影响及其分子机制.方法 将sv-cystatin重组蛋白(10,25,50,100,200 mg·L-1)作用于B16F10和MHCC97H细胞,C57BL/6小鼠尾静脉注射B16F10细胞建立黑色素细胞荷瘤模型并给予25,50 mg·kg-1的sv-cystatin重组蛋白干预,建立MHCC97H细胞BALB/c-nude裸鼠腋下皮内成瘤模型并给予25,50,100 mg·kg-1的sv-cystatin重组蛋白干预,分别检测体内外细胞凋亡,检测重组蛋白体外作用后肿瘤细胞Bcl-2、Bcl-w和Bax的基因与蛋白表达,检测Cyto C蛋白表达和caspase-2、caspase-3酶活性.结果 与对照组相比,25,50,100,200 mg·L-1的sv-cystatin重组蛋白能够增强2种肿瘤细胞的体外凋亡能力(P＜0.05);C57BL/6小鼠肺转移结节中B16F10细胞(50 mg·kg-1)和BALB/c-nude腋下皮内肿瘤组织中MHCC97H细胞(100 mg·kg-1)的凋亡增强(P＜0.05);体外处理B16F10和MHCC97H细胞后Bcl-2和Bcl-w的基因与蛋白表达均下降,Bax表达则增强(P＜0.05),Cyto C蛋白表达增强(P＜0.05),caspase-2和caspase-3的活性上调(P＜0.05).结论 Sv-cystatin重组蛋白能够促进肿瘤细胞凋亡,从而发挥抗肿瘤作用.