ABCA1胞内第三环缺失突变体的抗砷性研究

目的 分析ABCA1胞外第三环(第843-1 348位氨基酸残基)缺失突变体的抗砷功能.方法 分别转染空载体、第843-1 348位氨基酸残基ABCA1缺失(ABCA1△843-1 348)突变体和全长ABCA1到HeLa细胞,激光共聚焦显微镜观察其定位,CCK-8法检测急性砷暴露24 h后细胞生存率的改变,并用原子荧光吸收光谱法检测细胞内的砷蓄积量.结果 激光共聚焦结果表明,突变体与全长ABCA1都定位在细胞膜上.突变体和全长ABCA1转染组在各砷浓度处理条件下的生存率没有差异(P＞0.05),均高于空载体对照组(P＜0.05).转染空载体、全长和突变体ABCA1细胞24 h半数抑制浓度IC50值分别为19.17 μM、31.64 μM、29.73 μM.10 μM亚砷酸钠处理条件下,转染全长和突变体ABCA1细胞内砷含量在4 h后趋于稳定,而转染空载体的细胞内砷含量仍持续升高,3组差异有统计学意义(P＜0.05).转染全长和ABCA1△843-1 348突变体细胞内各个时间点的砷含量没有差异(P＞0.05).结论 ABCA1△843-1 348突变体仍具有抗砷性,提示该区域不是ABCA1抗砷的关键功能结构域.