基于TGF-β1信号通路研究小檗碱联合芒柄花黄素抑制鼻咽癌细胞迁移的作用机制

目的 研究小檗碱联合芒柄花黄素对鼻咽癌细胞迁移的影响,探讨转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)信号通路在其效应中的作用.方法 采用实时无标记细胞功能分析仪监测小檗碱和芒柄花黄素单用及联合使用对鼻咽癌5-8F、6-10B细胞增殖的影响;采用划痕实验和Transwell实验检测TGF-β1信号通路激活后,小檗碱联合芒柄花黄素抑制细胞迁移效应的变化;采用Western blotting检测TGF-β1信号通路关键蛋白和迁移相关蛋白的表达.结果 与对照组比较,小檗碱和芒柄花黄素单用可抑制5-8F和6-10B细胞增殖,小檗碱(5、10 μmol/L)和芒柄花黄素(5、10 μmol/L)联合作用于5-8F和6-10B细胞后,显示小檗碱联合芒柄花黄素抑制鼻咽癌细胞增殖以协同效应为主;小檗碱联合芒柄花黄素显著降低鼻咽癌细胞TGF-β1和Smad3蛋白表达水平(P＜0.05、0.01).采用TGF-β1激活TGF-β1信号通路后,小檗碱联合芒柄花黄素抑制鼻咽癌细胞迁移的效应显著降低(P＜0.01);与小檗碱10μmol/L+芒柄花黄素10μmol/L组相比,TGF-β1+小檗碱+芒柄花黄素组细胞 TGF-β1、Smad3、磷酸化细胞外调节激酶 1/2(phosphorylated extracellular signal regulated kinase 1/2,p-ERK1/2)蛋白表达水平显著上调(P＜0.05、0.01),N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)表达水平升高,E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平降低(P＜0.01).结论 小檗碱联合芒柄花黄素能够协同抑制鼻咽癌细胞迁移,其作用机制可能与抑制TGF-β1信号通路有关.