高产酸性β-葡萄糖苷酶的优良本土酵母菌株筛选、鉴定及酶学性质分析

为获得高产酸性 β-葡萄糖苷酶及对葡萄酒生境耐受性良好的本土非酿酒酵母菌株,该文从452株本土非酿酒酵母菌株中通过逐步分析菌株发酵力、耐受性、高产 β-葡萄糖苷酶能力和粗酶液的酶学性质,筛选目标酵母菌株.结果表明,452株非酿酒酵母菌株中72 h的CO2失重量>0.51 g/100mL的菌株有221株;高产 β-葡萄糖苷酶的菌株34株;菌株GC204、NM218、ZC278、ZC287、BF345、BF370对葡萄糖、SO2、酒精度和pH值均具有较好的耐受性,分别能耐受高糖350 g/L、酒精3％ ～6％(体积分数)、SO2250 mg/L和低pH值2.5;其中菌株GC204、NM218、BF345均具有较高的 β-葡萄糖苷酶活力,分别为54.34、49.5、46.42 mU/mL.酶学性质分析表明,菌株NM218和BF345中的 β-葡萄糖苷酶最适反应温度为40℃,最适pH值为4.0;浓度为5 mmol/L的Zn2+、Mn2+、Fe2+、Fe3+对2种菌株的 β-葡萄糖苷酶活力均具有明显的激活作用;Cu2+具有明显的抑制作用;纤维二糖对2种菌株的 β-葡萄糖苷酶激活效果明显,酶活力提高30.18％ ～40.80％.通过26S rDNA D1/D2测序比对,同源性达99％,鉴定菌株NM218为季也蒙毕赤酵母(Meyerozyma guilliermondii),菌株BF345为葡萄汁有孢汉逊酵母(Hanseniaspora uvarum).