探讨半夏-薏苡仁对PCPA失眠模型大鼠海马食欲素及其受体和血清细胞因子的调控作用

背景 失眠症的发病率逐年增加,对人类身心健康造成严重危害.半夏-薏苡仁(BX-YYR)主要有效成分包括黄芩素、β-谷甾醇、豆甾醇等,但其治疗失眠症的具体作用机制尚不明确.目的 研究BX-YYR干预对氯苯丙氨酸(4-Chloro-DL-phenylalanine,PCPA)失眠模型大鼠的食欲素(Orexin)及其受体、细胞相关因子的调控作用.方法 采用PCPA诱导失眠大鼠模型,将实验大鼠分为6组,每组15只,分别为正常组(N)、模型组(M)、地西泮组(D)和BX-YYR低(ZL)、中(ZM)、高(ZH)剂量组,各组按10?mL/kg进行对应灌胃处理,连续7?d.进行戊巴比妥钠翻正实验和旷场实验.HE染色观察海马结构,免疫组化观察海马B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell?lymphoma-2,Bcl-2),酶联免疫吸附试验?(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(tumor?necrosis?factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β?(interleukin-1β,IL-1β)、IL-2、IL-6和Orexin含量,RT-PCR法检测OX1R和OX2R?mRNA表达;Western?blot法检测OX1R和OX2R表达.结果 戊巴比妥钠翻正实验显示失眠模型大鼠睡眠潜伏期显著延长、睡眠持续时间显著缩短(P均<0.01);旷场实验中模型大鼠总活动距离减少、进入中央格距离和修饰次数增加(P均<0.01).HE染色显示,M组海马CA1区神经元形态和结构损伤比较严重,BX-YYR各剂量组则相对减轻.免疫组化显示,与M组比较,ZH组大鼠海马Bcl-2阳性信号面积占比升高(P<0.01).ELISA显示,与M组比较,D组和ZL、ZM、ZH组大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-2和IL-6显著降低(P均<0.05),D组和ZM、ZH组大鼠血清和海马Orexin水平显著降低(P均<0.01).RT-PCR显示,与M组比较,ZL、ZM、ZH组海马OX1R?mRNA表达降低(P均<0.05).Western?blot检测显示,与M组比较,ZL、ZM、ZH组大鼠海马OX1R表达降低(P均<0.01),D组和ZL组大鼠海马OX2R表达升高(P均<0.05).结论 BX-YYR能够改善PCPA失眠模型大鼠的睡眠情况,同时调控血清TNF-α、IL-1β、IL-2、IL-6水平,其作用机制可能与调节海马Orexin、OX1R、OX2R表达,上调Bcl-2表达,从而抑制海马神经元细胞凋亡有关.