血清Ⅲ型鸭甲型肝炎病毒VP0蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
Chinese Journal of Veterinary Parasitology（2022）
摘要
血清Ⅲ型鸭甲型肝炎病毒(DHAV-3)属于小RNA病毒科,主要引起雏鸭以肝脏肿胀、出血为主的急性、烈性传染病.DHAV-3有3个主要结构蛋白,其中VP0蛋白具有极佳的抗原性及宿主保护位点.为研制鸭肝炎病毒VP0蛋白的单克隆抗体,本研究将鸭肝炎病毒的VP0基因进行原核表达,用纯化后的重组蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合、IFA筛选以及亚克隆后,获得了 1株能够稳定分泌抗VP0蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞3A5,亚类鉴定为IgG1,IFA检测腹水效价为1:12800.Western blot、IFA结果表明,制备的单克隆抗体效价高,反应原性强.本研究为后续建研制血清Ⅲ型鸭甲型肝炎病毒的快检试剂盒,及建立病原及抗体检测方法奠定基础.
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