听觉脑干植入豚鼠模型构建的标准化步骤及评价

目的·经听泡-迷路径路改良建立人工听觉脑干植入(auditory brainstem implantation,ABI)豚鼠模型并评价该模型的有效性和可靠性.方法·对20例听力正常的雄性健康成年白化豚鼠行改良后经听泡-迷路径路ABI手术,术中暴露脑干处耳蜗背侧核(dorsal cochlear nucleus,DCN)后植入豚鼠专用ABI电极阵列,记录电诱发听性脑干反应(evoke auditory brainstem response,eABR),并与术中耳蜗内eABR记录波形进行比较.留置ABI电极后,于术后48 h、7 d、30 d、180 d行安乐死前记录DCN处eABR波形;取出含电极脑组织,行苏木精-伊红染色、免疫荧光染色观察神经元、胶质、小胶质细胞的变化;定量PCR检测白介素-1β(interleukin-1 β,IL-1β)和基质金属蛋白酶9(matrix metalloprotein-9,MMP-9)的表达.结果·术中所有动物均成功引出DCN处eABR,术后死亡时间集中在电极植入后36～48 h.DCN处eABR波形形态与耳蜗处eABR相似,DCN处eABR中Ⅲ波相比耳蜗处eABR中IV潜伏期缩短(0.84±0.22)ms(n=19),DCN处较耳蜗处平均阈值减小(0.11±0.14)mA(n=19).术后DCN处eABR与术中比较,阈值平均增加(0.10±0.10)mA(n=16),Ⅲ波潜伏期平均延迟(0.15±0.21)ms(n=16).组织学形态分析显示电极周围的耳蜗核接触面在术后48 h出现空泡样变性,术后48h、7 d及180 d在DCN边缘均可见胶质成分增多.定量PCR结果显示IL-1β、MMP-9基因表达量在48 h与7 d时高于未植入电极豚鼠,但差异无统计学意义.结论·建立的ABI植入豚鼠模型经实验评估,建模成功率高且重复性好;初步观察到电极神经界面出现周围胶质及纤维成分增生.