miR-330-3p在颞下颌关节骨关节炎软骨退变中的作用机制研究

目的:探讨miR-330-3p在颞下颌关节骨关节炎(temporomandibular joint osteoarthritis,TMJOA)软骨退变中的作用机制.方法:对SW1353软骨细胞系进行炎症及加压刺激,建立大鼠单侧前牙反(unilateral anterior crossbite,UAC)TMJOA模型,通过RT-qPCR检测体外及体内软骨OA情况下miR-330-3p的表达变化.miR-330-3p过表达或抑制后,利用EDU荧光染色以及蛋白免疫印迹(WB)检测SW1353软骨细胞的增殖及合成分解代谢变化.生物信息学分析预测并筛选miR-330-3p的下游靶点,并在炎症及加压刺激下通过RT-qPCR和WB明确miR-330-3p对其调控作用.在miR-330-3p大鼠UAC TMJOA模型的关节腔内注射后,采用免疫组织化学方法检测靶分子的表达及软骨代谢的变化,明确miR-330-3p对TMJOA的治疗作用.采用SPSS 22.0软件包对数据进行统计学分析.结果:在体外炎症和加压刺激下,以及大鼠UAC的TMJOA模型中,miR-330-3p在软骨中的表达均下降.抑制miR-330-3p可导致软骨细胞增殖能力下降,SOX9合成降低,MMP13表达增加,而过表达的结果则相反.生物信息学分析发现CTNNB1为可能的下游靶点之一,其在体外炎症和加压刺激后表达升高.过表达CTNNB1后,软骨细胞SOX9蛋白表达下降,MMP13蛋白表达升高,抑制CTNNB1的结果则相反.miR-330-3p与CTNNB1在mRNA及蛋白表达水平上存在负相关关系.大鼠UAC TMJOA模型关节腔内注射miR-330-3p模拟物后,CTNNB1的表达减少,软骨退变减轻.结论:miR-330-3p通过抑制CTNNB1的表达,减轻TMJOA的软骨退变.