青藤碱通过阻止NF-κB通路激活抑制IL-1β诱导的椎间盘终板软骨细胞炎症及退变

目的 观察青藤碱对白细胞介素(IL)-1β 诱导的椎间盘终板软骨细胞中炎症及退变的影响.方法 使用胶原酶消化法将SD大鼠椎间盘终板软骨消化成软骨细胞,使用CCK-8法检测不同浓度的青藤碱对软骨细胞活力的影响.将软骨细胞分为5组,对照组,IL-1β组,0.1、0.5、1.0 mmol/ml青藤碱组.除对照组外,其余4组均予以IL-1β诱导模拟椎间盘退变环境.使用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测干预后各组细胞上清中IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、基质金属蛋白酶(MMP)-13及聚蛋白多糖酶(ADAMTS)5含量;qPCR检测各组细胞中IL-6、TNF-α、MMP-13及ADAMTS5的mRNA含量,Western印迹检测各组细胞中核转录因子(NF)-κB、IκB、IκK含量.结果 CCK-8结果显示0.1、0.5、1.0 mmol/ml青藤碱可以显著提升终板软骨细胞活力(P<0.05).ELISA及qPCR结果显示IL-1β诱导可以显著提高软骨细胞中IL-6、TNF-α、MMP-13及ADAMTS5表达水平(P<0.05);予以不同浓度青藤碱干预后结果显示IL-6、TNF-α、MMP-13及ADAMTS5表达量显著降低(P<0.05).Western印迹结果显示IL-1β可以明显促进NF-κB及IκK表达,抑制IκB表达;而青藤碱可以显著抑制NF-κB及IκK表达,促进IκB表达(P<0.05).结论 青藤碱可以通过抑制NF-κB通路激活抑制IL-1β 诱导的椎间盘终板软骨细胞炎症及退变,是潜在的IVDD的治疗药物.